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西湖大學(xué)生命科學(xué)院朱聽課題組利用全化學(xué)合成的高保真鏡像T7 RNA聚合酶成功制備多種鏡像RNA

文章信息

文章題目:Mirror-image T7 transcription of chirally inverted ribosomal and functional RNAs

 

期刊:Science

發(fā)表時(shí)間:2022年10月28日

主要內(nèi)容:西湖大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院朱聽課題組在Science雜志上發(fā)表了文章Mirror-image T7 transcription of chirally inverted ribosomal and functional RNAs,報(bào)道了利用全化學(xué)合成的高保真鏡像T7 RNA聚合酶成功制備多種鏡像RNA,包括鏡像核糖體RNA及功能性RNA。

原文鏈接:https://www.science.org/doi/10.1126/science.abm0646

使用TransGen產(chǎn)品:

TransStart??FastPfu Fly DNA Polymerase(AP231)

pEASY?-Uni seamless cloning and assembly kit(CU101)

Trans2K? Plus DNA marker(BM111)

Trans2K? Plus II DNA Marker(BM121)

100bp Plus II DNA ladder(BM321)



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研究背景

手性在多種學(xué)科中表示一種重要的對(duì)稱特點(diǎn),如果某物體與其鏡像不同,則其被稱為“手性的”。手性廣泛的存在于自然界中,所有形式的生命都依賴于單一手性的生物分子—即L-氨基酸和D-核酸。朱聽課題組致力于建立分子生物學(xué)中心法則的鏡像版本—DNA復(fù)制并轉(zhuǎn)錄成RNA,并被翻譯成蛋白質(zhì),構(gòu)建與天然生物分子手性相反的“鏡像生物學(xué)系統(tǒng)”。目前已經(jīng)完成了前兩個(gè)步驟,正在著力構(gòu)建鏡像蛋白質(zhì)翻譯系統(tǒng)。

文章概述

核糖體RNA是核糖體的結(jié)構(gòu)與催化核心,構(gòu)建鏡像蛋白質(zhì)翻譯系統(tǒng)的關(guān)鍵在于合成鏡像核糖體,即制備120 nt 的鏡像5S核糖體RNA、1.5 kb的鏡像16S核糖體RNA、2.9 kb 的鏡像23S核糖體RNA。受限于已有技術(shù),合成長(zhǎng)鏈鏡像RNA是研究者要攻克的首個(gè)目標(biāo)。為突破全化學(xué)合成對(duì)蛋白質(zhì)大小的限制,研究者利用分割蛋白質(zhì)的策略,成功合成具有完整功能的100 kDa高保真鏡像T7 RNA聚合酶,是目前已報(bào)道的最長(zhǎng)化學(xué)合成蛋白質(zhì),隨后,研究者利用該鏡像T7 RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄出全部三條鏡像核糖體RNA,最長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄長(zhǎng)度達(dá)2.9 kb,解決了大型鏡像生物分子的制備難題,為后續(xù)構(gòu)建鏡像蛋白質(zhì)翻譯系統(tǒng)、實(shí)現(xiàn)完整的鏡像中心法則及拓展鏡像生物學(xué)系統(tǒng)的實(shí)際應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。


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圖1:合成鏡像T7 RNA聚合酶


此外,研究者還進(jìn)行了鏡像RNA穩(wěn)定性研究,將長(zhǎng)度為1.5 kb 天然及鏡像16S核糖體RNA分別儲(chǔ)存在經(jīng)DEPC處理去除核糖核酸酶的超純水、取自自然環(huán)境中的荷塘水中,研究結(jié)果顯示,無(wú)論是否添加RNase抑制劑,鏡像16S核糖體RNA完全降解所需時(shí)間更長(zhǎng),具有獨(dú)特的生物穩(wěn)定性。該鏡像T7轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)有望被應(yīng)用于診斷治療、信息存儲(chǔ)、RNA相關(guān)基礎(chǔ)研究等領(lǐng)域。


全式金產(chǎn)品支撐

優(yōu)質(zhì)的試劑是科學(xué)研究的利器。全式金的DNA聚合酶TransStart??FastPfu Fly DNA Polymerase (AP231)、無(wú)縫克隆產(chǎn)品pEASY?-Uni seamless cloning and assembly kit (CU101)、DNA Marker Trans2K? Plus DNA marker (BM111)、Trans2K? Plus II DNA Marker (BM121)、100bp Plus II DNA ladder (BM321)助力本研究。

TransStart? FastPfu Fly DNA Polymerase(AP231)

一款用于快速PCR的熱啟動(dòng)超高保真DNA聚合酶,擴(kuò)增速度更快 (6 kb/min),擴(kuò)增效率高。多次榮登Science、Nature communications等知名期刊,助力科學(xué)研究。

? 熱啟動(dòng)、高特異性。

? 快速、超高保真。

? 高擴(kuò)增效率。

? 高靈敏度。

? 高產(chǎn)量。

pEASY?-Uni seamless cloning and assembly kit(CU101)

利用特殊的重組酶和同源重組的原理,將任意方法線性化后的載體和與其兩端具有15-25 bp重疊區(qū)域的PCR片段定向重組,實(shí)現(xiàn)1-7個(gè)片段的高效無(wú)縫拼接。自上市以來(lái)備受客戶喜愛,多次榮登Science、Nature communications等知名期刊,助力科學(xué)研究。

? 快速:僅需要15分鐘反應(yīng)時(shí)間。

? 簡(jiǎn)單:不受片段酶切位點(diǎn)的影響,無(wú)需對(duì)片段酶切。

? 高效:陽(yáng)性率達(dá)95% 以上。

? 無(wú)縫:不引入額外的序列。

Trans2K? Plus DNA marker(BM111)

Trans2K? Plus II DNA Marker(BM121)

100bp Plus II DNA ladder(BM321)

即用型產(chǎn)品,使用方便,電泳圖像清晰,是眾多實(shí)驗(yàn)室的必備產(chǎn)品。

? 條帶簡(jiǎn)單清晰,易于判斷。

? 同時(shí)判斷酶切后載體片段和插入片段的大小。

 

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全式金產(chǎn)品再一次登上Science期刊, 證明了大家對(duì)全式金產(chǎn)品品質(zhì)和實(shí)力的認(rèn)可,也完美詮釋了全式金一直以來(lái)秉承的“品質(zhì)高于一切,精品服務(wù)客戶”的理念。

全式金始終在助力科研的道路上砥礪前行,為了感謝廣大客戶十六年來(lái)對(duì)全式金生物的默默支持與厚愛;為了促進(jìn)我國(guó)生命科學(xué)研究事業(yè)的蓬勃發(fā)展;為了成就生命科學(xué)的夢(mèng)想。我公司自2014年1月1日開始對(duì)使用我公司產(chǎn)品并發(fā)表高水平學(xué)術(shù)文章的科學(xué)研究人員給予獎(jiǎng)勵(lì)。歡迎新老客戶參與其中,與我們共同分享您成功的喜悅。希望全式金未來(lái)能與更多的科研工作者并肩奮斗,用更多更好的產(chǎn)品持續(xù)助力科研。


使用TransStart? FastPfu Fly DNA Polymerase (AP231)產(chǎn)品發(fā)表的部分文章:

?  Xu Y, Zhu T F. Mirror-image T7 transcription of chirally inverted ribosomal and functional RNAs[J].Science, 2022.

?  Wang D, Yan F, Wu P, et al. Global profiling of regulatory elements in the histone benzoylation pathway[J]. Nature communications, 2022.

?  Niu L, Shen W, Shi Z, et al. Three-dimensional folding dynamics of the Xenopus tropicalis genome[J]. Nature Genetics, 2021.

?  Chen J, Wang H, Yang X, et al. Consumption of miRNA-mediated insect-resistant transgenic rice pollen does not harm Apis mellifera adults[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2021.

使用pEASY?-Uni seamless cloning and assembly kit(CU101)產(chǎn)品發(fā)表的部分文章:

?  Xu Y, Zhu T F. Mirror-image T7 transcription of chirally inverted ribosomal and functional RNAs[J].Science, 2022.

?  Jin Q, Yang X, Gou S, et al. Double knock-in pig models with elements of binary Tet-On and phiC31 integrase systems for controllable and switchable gene expression[J]. Science China Life Sciences, 2022.

?  Duan Y, Liu S, Gao Y, et al. Macrolides mediate transcriptional activation of the msr (E)-mph (E) operon through histone-like nucleoid-structuring protein (HNS) and cAMP receptor protein (CRP)[J]. Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 2022.

?  Li B, Zhu L, Lu C, et al. circNDUFB2 inhibits non-small cell lung cancer progression via destabilizing IGF2BPs and activating anti-tumor immunity[J]. Nature communications, 2021.

使用Trans2K? Plus DNA marker(BM111)產(chǎn)品發(fā)表的部分文章:

?  Xu Y, Zhu T F. Mirror-image T7 transcription of chirally inverted ribosomal and functional RNAs[J].Science, 2022.

使用Trans2K? Plus II DNA Marker(BM121)產(chǎn)品發(fā)表的部分文章:

?  Xu Y, Zhu T F. Mirror-image T7 transcription of chirally inverted ribosomal and functional RNAs[J].Science, 2022.

?  Jin S, Fei H, Zhu Z, et al. Rationally designed APOBEC3B cytosine base editors with improved specificity[J]. Molecular cell, 2020.

使用100bp Plus II DNA ladder(BM321)產(chǎn)品發(fā)表的部分文章:

?  Xu Y, Zhu T F. Mirror-image T7 transcription of chirally inverted ribosomal and functional RNAs[J].Science, 2022.


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